kromatografia on hyödyllinen tekniikka, jolla voidaan tarkasti erottaa, analysoida ja puhdistaa laaja valikoima näytteitä, mukaan lukien elintarvike -, lääke -, torjunta-aine -, ilma-ja vesinäytteet sekä kudosuutteet.Olisitte nähneet eriväristen yhdisteiden erottelun yksinkertaisella paperikromatografisella erotustekniikalla koulunne laboratoriossa.
tekniikka oli helppotajuinen eikä vaatinut kalliita laitteita. Se tarjosi visuaalisen ymmärryksen erottelutieteen käsitteistä. Collegeaikanasi olisit myös törmännyt ohutkerroskromatografisiin separaatioihin yhdisteistä, jotka erotuksen jälkeenkin voivat olla tai eivät ole tunnistettavissa silmästä ilman erotuslevyn käsittelyä.
Lue lisää kromatografiasta, kromatografian eduista, sen tyypeistä sekä TLC-ja paperikromatografian eroista.
Mitä Kromatografia On?
se on laboratoriotekniikka, jolla seoksen eri komponentit erotetaan kiinteistä ja liikkuvista faaseista. Kromatografiatekniikassa seoksen eri komponentit liikkuvat stationäärifaasin läpi eri nopeuksilla, jolloin ne erkanevat toisistaan ja esiintyvät adsorbentin eri kohdissa. Kromatografian esitteli maailmalle ensimmäisenä tutkija M. S Tswett vuonna 1903.
Paperikromatografia
se on analyyttinen tekniikka, jolla partikkelit erotetaan toisistaan niiden polaarisuuden perusteella liikkuvaa faasia ja stationäärifaasia kohti. Paperikromatografia on kiinteä-neste-jakautumistapa, jossa stationäärifaasi on selluloosasuodatinpaperi ja liikkuva faasi on nestemäinen.
Paperikromatografian edut ja haitat
paperikromatografiatekniikassa on erilaisia etuja ja haittoja.
Paperikromatografian edut
paperikromatografian tärkein etu on se, että se tarjoaa yksinkertaisia, edullisia ja vaivattomia operaatioita. Myös paperikromatografian asennus vie vähemmän tilaa ja vaatii vähemmän näytemäärää analysointia varten.
Paperikromatografian haitat
haihtuvia tai kompleksisia aineita ei voida erottaa toisistaan paperikromatografiatekniikoilla. Menetelmä ei ole hyödyllinen suuren näytemäärän testaamiseen, eivätkä tiedot ole yhtä tarkkoja kuin TLC-tekniikan tapauksessa.
ohutkerroskromatografia
se on kiinteä-neste-adsorptiokromatografia, jota käytetään haihtumattomien seosten eristämiseen. TLC-menetelmässä stationäärifaasi on silikageelillä päällystetty lasilevy ja liikkuva faasi on neste. Hiukkaset erotetaan toisistaan polaarisuutensa perusteella liikkuvaa faasia ja stationaarista faasia kohti.
Ohutkerroskromatografian edut ja haitat
vaikka ohutkerroskromatografialla on monia etuja, sillä on myös joitakin haittoja tai rajoituksia.
Ohutkerroskromatografian edut
se on erittäin herkkä tekniikka, joka antaa tarkat tulokset. Menetelmä vaatii hyvin pienen määrän näytettä ja kromatografiset erotukset kestävät vain noin puoli tuntia. Lisäksi voidaan käyttää ohutkerroskromatografiatekniikkaa erotusten sekä UV-valolle reagoivien yhdisteiden kolorimetriseen havaitsemiseen.
Ohutkerroskromatografian haitat
helppoudestaan huolimatta ohutkerroskromatografialla ei voida kertoa yhdisteen isomeeristen ja enantiomeeristen muotojen eroja. TLC: tä voidaan soveltaa myös vain haihtumattomiin yhdisteisiin, mikä rajoittaa sen käyttöä.
ohutkerroskromatografia vs. Paperikromatografia
tärkeimmät erot TLC-ja paperikromatografian välillä ovat:
- ohutkerroskromatografian periaate perustuu adsorptioon. Toisaalta paperikromatografian periaate perustuu jakaantumiseen.
- ohutkerroskromatografia vaatii enemmän valmisteluaikaa kuin paperikromatografia.
- ohutkerroskromatografian stationäärifaasi on silikageelillä päällystetyt lasilevyt, kun taas paperikromatografian stationäärifaasi on selluloosasuodatinpaperiin jäänyt vesi.
- ohutkerroskromatografiassa voidaan käyttää syövyttäviä reagensseja, mutta ei paperikromatografiassa, koska syövyttävät aineet voivat tuhota paperin.
- UV-lampun alla voi ohutkerroskromatografiassa nähdä erilaisia täpliä. Tämä on mahdollista, koska TLC-levyn fluoresoiva silikageeliseos hohtaa ultraviolettivalon alla, jolloin tumma täplä näkyy hehkuvalla taustalla. Täpliä ei voida nähdä PAPERIKROMATOGRAFIATEKNIIKALLA UV-valossa.
- ohutkerroskromatografia vaatii enemmän aikaa hiukkasten erottamiseen, kun taas paperikromatografia vaatii vähemmän aikaa.
mitä etuja Ohutkerroskromatografialla on Paperikromatografiaan verrattuna?
Ohutkerroskromatografialla on useita etuja verrattuna paperikromatografisiin erotuksiin. Joitakin etuja ovat:
ajansäästö
kromatografin suurin etu on ajansäästö. Paperikromatografiassa levyn kehittäminen voi kestää useita tunteja, kun taas ohutkerroskromatografiassa kehitys voidaan suorittaa paljon lyhyemmässä ajassa (noin puoli tuntia)
automaatio
Paperikromatografiassa ei ole vuosien saatossa nähty juurikaan automaatiota, mutta ohutkerroskromatografiassa käytettävissä laitteissa on automaatiokyky, johon kuuluvat automaattitäyttäjä, vakiotilavuusnäyteannostelija, dokumentaatio ja kamera erotustietojen tallentamiseen
jäykkä tuki
selluloosapaperin tuki paperikromatografiassa on joustava kun taas adsorbentti TLC on päällystetty jäykälle metalli -, lasi-tai muovilevylle. Tämä edistää pilkkujen toistettavuutta ja nopeampaa kehitystä. Tukijäykkyyden vuoksi diffuusiota on vähemmän ja sen seurauksena muodostuu hyvin määriteltyjä paikkoja.
tuen valinta
TLC sisältää laajan valikoiman tuki-adsorbenttifaaseja, mukaan lukien nestemäiset pinnoitetut adsorbentit, jotka voivat sisältää myös fluoresenssia indusoivia aineita. Toisaalta paperien valinta paperikromatografiassa on hyvin vähäistä.
Kehityskammion suunnittelu
levyä ei tarvitse suspendoida paperikromatografiassa vaaditulla tavalla kehityskammion päällä olevasta tangosta. Se voidaan yksinkertaisesti sijoittaa vinoon asentoon, jossa sen alareuna lepää kammion pohjalla.
Näytetilavuus
levitettävän näytteen määrä on pieni( mikrolitroituina), ja se voidaan toistaa automaattisten näyteannostelijoiden avulla
Suihkureagenssien valinta
syövyttävät suihkureagenssit voivat hiertää suodatinpaperia ja jopa heikentää näytekohtia. Ohutkerroskromatografiassa käytettävät pinnoitetut levyt kestävät syövyttäviä ruiskureagensseja enemmän
Lämmitys
Ohutkerroskromatografialevyjä voidaan kuumentaa, jos sitä tarvitaan pistekehitykseen. Paperikromatografialevyt eivät kestä kuumentamista yli pisteen.
tiivistettynä ohutkerroskromatografia tarjoaa erotutkijalle useita etuja vain ohutkerroskromatografian pienen lisäkustannuksen vuoksi.