cromatografia este o tehnică utilă pentru a separa, analiza și purifica cu precizie o gamă largă de probe, inclusiv alimente, produse farmaceutice, pesticide, probe de aer și apă și extracte de țesuturi.Ați fi văzut separarea diferiților compuși colorați folosind tehnica simplă de separare cromatografică a hârtiei în laboratorul școlii.
tehnica a fost simplu de înțeles și nu a necesitat nici un echipament scump. V-a oferit o înțelegere vizuală a conceptelor științei separării. În timpul colegiului dvs. ați fi întâlnit, de asemenea, separări cromatografice în strat subțire de compuși care, chiar și după separare, pot fi sau nu identificabili de ochi fără tratarea plăcii de separare.
citiți mai departe pentru a afla mai multe despre cromatografie, avantajele cromatografiei, tipurile acesteia și diferențele dintre TLC și cromatografia pe hârtie.
Ce Este Cromatografia?
este tehnica de laborator pentru separarea diferitelor componente ale unui amestec de fazele staționare și mobile. În tehnica cromatografiei, diferite componente ale amestecului se deplasează prin faza staționară la viteze diferite, ceea ce le determină să se separe una de cealaltă și să apară în diferite locuri ale adsorbantului. Tehnica cromatografiei a fost introdusă pentru prima dată în lume în 1903 de către omul de știință M. S Tswett.
cromatografie pe hârtie
este o tehnică analitică utilizată pentru separarea particulelor pe baza polarității lor față de faza mobilă și faza staționară. Cromatografia hârtiei este un tip de metodă de partiție solid-lichid în care faza staționară este hârtia de filtru de celuloză, iar faza mobilă este lichidă.
avantajele și dezavantajele cromatografiei pe hârtie
tehnica cromatografiei pe hârtie oferă diverse avantaje și dezavantaje.
avantajele cromatografiei pe hârtie
principalul avantaj al cromatografiei pe hârtie este că oferă operații simple, cu costuri reduse și fără probleme. De asemenea, configurarea cromatografiei pe hârtie ocupă mai puțin spațiu și necesită o cantitate mai mică de probă pentru analiză.
dezavantajele cromatografiei pe hârtie
substanțele Volatile sau complexe nu pot fi separate prin tehnici de cromatografie pe hârtie. Metoda nu este utilă pentru testarea unui număr mare de eșantioane, iar datele nu sunt la fel de exacte ca în cazul tehnicii TLC.
cromatografie în strat subțire
este o tehnică de cromatografie de adsorbție solid-lichid utilizată pentru izolarea amestecurilor nevolatile. În metoda TLC, faza staționară este placa de sticlă acoperită cu silicagel, iar faza mobilă este lichidul. Particulele se separă pe baza polarității lor față de faza mobilă și faza staționară.
avantajele și dezavantajele cromatografiei în strat subțire
în timp ce cromatografia în strat subțire oferă multe avantaje, are și unele dezavantaje sau limitări.
avantajele cromatografiei în strat subțire
este o tehnică extrem de sensibilă care oferă rezultate precise. Metoda necesită o cantitate foarte mică de probă și durează doar aproximativ o jumătate de oră sau cam asa ceva pentru separări cromatografice. În plus, o tehnică de cromatografie în strat subțire poate fi utilizată pentru detectarea colorimetrică a separărilor, precum și a compușilor receptivi la lumina UV.
dezavantaje ale cromatografiei în strat subțire
în ciuda confortului său, cromatografia în strat subțire nu poate fi utilizată pentru a spune diferențele dintre formele izomerice și enantiomerice ale unui compus. De asemenea, TLC se aplică numai compușilor nevolatili, limitând astfel utilizarea acestuia.
cromatografie în strat subțire vs. cromatografie pe hârtie
principalele diferențe dintre TLC și cromatografia pe hârtie sunt:
- principiul din spatele cromatografiei în strat subțire se bazează pe adsorbție. Pe de altă parte, principiul cromatografiei pe hârtie se bazează pe partiție.
- cromatografia în strat subțire necesită mai mult timp de pregătire în comparație cu cromatografia pe hârtie.
- faza staționară a cromatografiei în strat subțire este plăcile de sticlă acoperite cu silicagel, în timp ce faza staționară a cromatografiei pe hârtie este apa prinsă în hârtia de filtru de celuloză.
- în cromatografia în strat subțire, pot fi utilizați reactivi corozivi, dar nu și în cazul cromatografiei pe hârtie, deoarece agenții corozivi pot distruge hârtia.
- puteți vedea diferite pete sub lampa UV în cromatografia în strat subțire. Acest lucru este posibil deoarece amestecul de silicagel fluorescent de pe placa TLC strălucește sub lumina ultravioletă, făcând pata întunecată vizibilă pe un fundal strălucitor. Petele nu pot fi văzute folosind tehnica cromatografiei pe hârtie sub lumină UV.
- cromatografia în strat subțire necesită mai mult timp pentru separarea particulelor, în timp ce cromatografia pe hârtie necesită mai puțin timp.
care sunt avantajele cromatografiei în strat subțire față de cromatografia pe hârtie?
cromatografia în strat subțire oferă mai multe avantaje față de separările cromatografice pe hârtie. Unele dintre beneficii sunt:
economie de timp
cel mai mare avantaj oferit cromatografului este economisirea timpului. Cromatografia pe hârtie poate dura câteva ore pentru a dezvolta placa, în timp ce dezvoltarea cromatografiei în strat subțire poate fi finalizată într-un timp mult mai scurt (aproximativ o jumătate de oră)
automatizare
cromatografia pe hârtie nu a văzut multă automatizare de-a lungul anilor, dar instrumentele de cromatografie în strat subțire disponibile au capacități de automatizare care includ autosampler, distribuitor de probe cu volum constant, documentație și cameră pentru păstrarea înregistrării picturale a separărilor
suport Rigid
suportul pentru hârtie celulozică în cromatografia hârtiei este flexibil în timp ce adsorbantul din TLC este acoperit pe o placă rigidă din metal, sticlă sau plastic. Acest lucru contribuie la reproductibilitatea petelor și la o dezvoltare mai rapidă. Datorită rigidității suportului, există o difuzie mai mică și, ca urmare, se formează pete bine definite.
alegerea suportului
TLC prezintă o gamă largă de faze adsorbante suport, inclusiv adsorbanți acoperite cu lichid, care pot include inductori de fluorescență, de asemenea. Pe de altă parte, alegerea hârtiei în cromatografia hârtiei este foarte limitată.
proiectarea camerei de dezvoltare
nu este necesar să se suspende placa conform cerințelor cromatografiei pe hârtie de la o tijă din partea superioară a camerei de dezvoltare. Acesta poate fi pur și simplu plasat într-o poziție înclinată, cu marginea inferioară sprijinită pe baza camerei.
volumul eșantionului
cantitatea eșantionului aplicat este mică( în microlitri) și poate fi aplicată reproductibil cu ajutorul dozatoarelor automate de eșantionare
alegerea reactivilor de pulverizare
reactivii de pulverizare corozivi pot caracteriza hârtia de filtru și chiar pot deteriora petele eșantionului. Plăcile acoperite utilizate în cromatografia în strat subțire pot rezista la reactivi de pulverizare corozivi într-o măsură mai mare
încălzire
plăcile de cromatografie în strat subțire pot fi încălzite dacă este necesar pentru dezvoltarea la fața locului. Foile de cromatografie din hârtie nu pot rezista încălzirii dincolo de un punct.
în rezumat cromatografia în strat subțire oferă mai multe avantaje omului de știință de separare doar pentru un cost suplimentar mic al plăcilor acoperite cu strat subțire.