kromatografi är en användbar teknik för att exakt separera, analysera och rena ett brett spektrum av prover, inklusive livsmedel, läkemedel, bekämpningsmedel, luft-och vattenprover och vävnadsextrakt.Du skulle ha sett separationen av olika färgade föreningar med den enkla papperskromatografiska separationstekniken i ditt skollaboratorium.
tekniken var enkel att förstå och krävde ingen dyr utrustning. Det gav dig en visuell förståelse av begreppen separationsvetenskap. I din college tid skulle du också ha stött på tunna skikt kromatografi separationer av föreningar som även efter separation kan eller inte kan identifieras av ögat utan behandling av separationsplattan.
läs vidare för att lära dig mer om kromatografi, fördelar med kromatografi, dess typer och skillnader mellan TLC och papperskromatografi.
Vad Är Kromatografi?
det är laboratorietekniken för att separera olika komponenter i en blandning från de stationära och mobila faserna. I kromatografitekniken rör sig olika komponenter i blandningen genom den stationära fasen med olika hastigheter vilket får dem att skilja sig från varandra och visas på olika fläckar på adsorbenten. Kromatografitekniken introducerades först för världen 1903 av forskaren M. S Tswett.
Papperskromatografi
det är en analytisk teknik som används för att separera partiklar på grundval av deras polaritet mot mobilfasen och den stationära fasen. Papperskromatografi är en typ av fast-flytande partitionsmetod där den stationära fasen är cellulosafilterpapperet och den mobila fasen är flytande.
fördelar och nackdelar med Papperskromatografi
papperskromatografitekniken erbjuder olika fördelar och nackdelar.
fördelar med Papperskromatografi
den största fördelen med papperskromatografi är att den erbjuder enkla, billiga och problemfria operationer. Dessutom upptar installationen av papperskromatografi mindre utrymme och det kräver mindre mängd prov för analys.
nackdelar med Papperskromatografi
flyktiga eller komplexa ämnen kan inte separeras med papperskromatografitekniker. Metoden är inte användbar för att testa ett stort antal prover och data är inte lika exakta som i fallet med TLC-tekniken.
tunnskiktskromatografi
det är en fast-flytande adsorptionskromatografiteknik som används för att isolera icke-flyktiga blandningar. I TLC-metoden är den stationära fasen glasplattan belagd med silikagelen och den mobila fasen är vätskan. Partiklarna separeras på grundval av deras polaritet mot mobilfasen och den stationära fasen.
fördelar och nackdelar med tunnskiktskromatografi
medan tunnskiktskromatografi erbjuder många fördelar, har den också vissa nackdelar eller begränsningar.
fördelar med tunnskiktskromatografi
det är en mycket känslig teknik som ger exakta resultat. Metoden kräver en mycket liten mängd prov och tar bara ungefär en halvtimme eller så för kromatografiska separationer. Dessutom kan en tunnskiktskromatografiteknik användas för kolorimetrisk detektion av separationer såväl som föreningar som svarar mot UV-ljus.
nackdelar med tunnskiktskromatografi
trots dess bekvämlighet kan tunnskiktskromatografi inte användas för att berätta skillnaderna mellan isomera och enantiomera former av en förening. TLC är också tillämpligt på endast icke-flyktiga föreningar, vilket begränsar dess användning.
tunnskiktskromatografi vs Papperskromatografi
de viktigaste skillnaderna mellan TLC och papperskromatografi är:
- principen bakom tunnskiktskromatografi är baserad på adsorption. Å andra sidan är principen om papperskromatografi baserad på partition.
- tunnskiktskromatografi kräver mer förberedelsetid jämfört med papperskromatografi.
- den stationära fasen av tunnskiktskromatografi är glasplattorna belagda med silikagel medan den stationära fasen av papperskromatografi är vattnet som fångas i cellulosafilterpapperet.
- i tunnskiktskromatografi kan frätande reagens användas men inte i fallet med papperskromatografi, eftersom de frätande ämnena kan förstöra papperet.
- du kan se olika fläckar under UV-lampan i tunnskiktskromatografin. Detta är möjligt eftersom den fluorescerande silikagelblandningen på TLC-plattan lyser under ultraviolett ljus, vilket gör den mörka fläcken synlig på en glödande bakgrund. Fläckarna kan inte ses med hjälp av papperskromatografitekniken under UV-ljus.
- tunnskiktskromatografi kräver mer tid för partikelseparation medan papperskromatografi kräver mindre tid.
vilka är fördelarna med tunnskiktskromatografi över Papperskromatografi?
tunnskiktskromatografi erbjuder flera fördelar jämfört med papperskromatografiska separationer. Några av fördelarna är:
tidsbesparing
den största fördelen som erbjuds kromatografen är tidsbesparande. Papperskromatografi kan ta flera timmar att utveckla plattan medan utvecklingen i tunnskiktskromatografi kan slutföras på mycket kortare tid (ungefär en halvtimme eller så)
Automation
Papperskromatografi har inte sett mycket automatisering genom åren men tillgängliga tunnskiktskromatografiinstrument har automatiseringsfunktioner som inkluderar autosampler, konstant volymprovdispenser, dokumentation och kamera för att behålla bildregistrering av separationer
styvt stöd
cellulosapappersstödet i papperskromatografi är flexibelt adsorbenten i TLC är belagd på en styv metall -, glas-eller plastplatta. Detta bidrar till reproducerbarhet av fläckar och snabbare utveckling. På grund av stödstyvhet är det mindre diffusion och som ett resultat bildas väldefinierade fläckar.
val av stöd
TLC presenterar ett stort urval av stöd adsorbentfaser inklusive vätskebelagda adsorbenter som också kan inkludera fluorescensinducerare. Å andra sidan är valet av papper i papperskromatografi mycket begränsat.
Utvecklingskammardesign
det är inte nödvändigt att suspendera plattan som krävs i papperskromatografi från en stång ovanpå utvecklingskammaren. Den kan enkelt placeras i ett lutande läge med sin nedre kant vilande på kammarbasen.
provvolym
mängden prov som appliceras är liten( i mikroliter) och kan reproducerbart appliceras med hjälp av automatiserade provdispensrar
val av Sprayreagens
frätande sprayreagens kan char filterpapperet och kan till och med försämra provfläckarna. Belagda plattor som används i tunnskiktskromatografi kan tåla korrosiva sprutreagenser i större utsträckning
uppvärmning
Tunnskiktskromatografiplattor kan värmas om det behövs för spotutveckling. Papperskromatografiark tål inte uppvärmning utöver en punkt.
Sammanfattningsvis erbjuder tunnskiktskromatografi flera fördelar för separationsforskaren endast för en liten extra kostnad för de tunna skiktbelagda plattorna.