kromatografi er en nyttig teknik til præcist at adskille, analysere og rense en lang række prøver, herunder fødevarer, lægemidler, pesticider, luft-og vandprøver og vævsekstrakter.Du ville have set adskillelsen af forskellige farvede forbindelser ved hjælp af den enkle papirkromatografiske separationsteknik i dit skolelaboratorium.
teknikken var enkel at forstå og krævede ikke noget dyrt udstyr. Det gav dig en visuel forståelse af begreberne separationsvidenskab. I din college-tid ville du også have stødt på tyndtlagskromatografiseparationer af forbindelser, som selv efter adskillelse måske eller måske ikke kan identificeres af øjet uden behandling af separationspladen.
læs videre for at lære mere om kromatografi, fordele ved kromatografi, dens typer og forskelle mellem TLC og papirkromatografi.
Hvad Er Kromatografi?
det er laboratorieteknikken til adskillelse af forskellige komponenter i en blanding fra de stationære og mobile faser. I kromatografiteknikken bevæger forskellige komponenter i blandingen sig gennem den stationære fase med forskellige hastigheder, som får dem til at adskille sig fra hinanden og vises på forskellige pletter på adsorbenten. Kromatografiteknikken blev først introduceret til verden i 1903 af forskeren M. S Tvett.
Papirkromatografi
det er en analytisk teknik, der bruges til at adskille partikler på basis af deres polaritet mod den mobile fase og den stationære fase. Papirkromatografi er en type fast-flydende partitionsmetode, hvor den stationære fase er cellulosefilterpapiret, og den mobile fase er flydende.
fordele og ulemper ved Papirkromatografi
papirkromatografiteknikken giver forskellige fordele og ulemper.
fordele ved Papirkromatografi
den største fordel ved papirkromatografi er, at den tilbyder enkle, lave omkostninger og problemfri operationer. Også opsætningen af papirkromatografi optager mindre plads, og det kræver mindre mængde prøve til analyse.
ulemper ved Papirkromatografi
Flygtige eller komplekse stoffer kan ikke adskilles ved hjælp af papirkromatografiteknikker. Metoden er ikke nyttig til test af et stort antal prøver, og data er ikke så nøjagtige som i tilfældet med TLC-teknikken.
Tyndlagskromatografi
det er en fast-flydende adsorptionskromatografiteknik, der anvendes til at isolere ikke-flygtige blandinger. I TLC-metoden er den stationære fase glaspladen belagt med silicagelen, og den mobile fase er væsken. Partiklerne bliver adskilt på grundlag af deres polaritet mod den mobile fase og stationære fase.
fordele og ulemper ved tyndtlagskromatografi
mens tyndtlagskromatografi giver mange fordele, har den også nogle ulemper eller begrænsninger.
fordele ved tyndtlagskromatografi
det er en meget følsom teknik, der giver nøjagtige resultater. Metoden kræver en meget lille mængde prøve og tager kun ca.en halv time eller deromkring for kromatografiske separationer. Derudover kan en tyndtlagskromatografiteknik anvendes til kolorimetrisk detektion af separationer såvel som forbindelser, der reagerer på UV-lys.
ulemper ved tyndtlagskromatografi
på trods af dets bekvemmelighed kan tyndtlagskromatografi ikke bruges til at fortælle forskellene mellem isomere og enantiomere former for en forbindelse. TLC gælder også kun for ikke-flygtige forbindelser, hvilket begrænser dets anvendelse.
Tyndlagskromatografi vs. Papirkromatografi
de vigtigste forskelle mellem TLC og papirkromatografi er:
- princippet bag tyndtlagskromatografi er baseret på adsorption. På den anden side er princippet om papirkromatografi baseret på partition.
- tyndtlagskromatografi kræver mere forberedelsestid sammenlignet med papirkromatografi.
- den stationære fase af tyndtlagskromatografi er glaspladerne belagt med silicagel, mens den stationære fase af papirkromatografi er vandet fanget i cellulosefilterpapiret.
- i tyndtlagskromatografi kan ætsende reagenser anvendes, men ikke i tilfælde af papirkromatografi, da de ætsende stoffer kan ødelægge papiret.
- du kan se forskellige pletter under UV-lampen i tyndlagskromatografien. Dette er muligt, fordi den fluorescerende silicagelblanding på TLC-pladen lyser under ultraviolet lys, hvilket gør den mørke plet synlig på en glødende baggrund. Pletterne kan ikke ses ved hjælp af papirkromatografiteknikken under UV-lys.
- tyndtlagskromatografi kræver mere tid til partikeladskillelse, mens papirkromatografi kræver mindre tid.
Hvad er fordelene ved Tyndlagskromatografi frem for Papirkromatografi?
tyndtlagskromatografi giver flere fordele i forhold til papirkromatografiske separationer. Nogle af fordelene er:
tidsbesparelse
den største fordel, der tilbydes kromatografen, er tidsbesparende. Papirkromatografi kan tage flere timer at udvikle pladen, mens udvikling i tyndtlagskromatografi kan afsluttes på meget kortere tid (ca. en halv time)
automatisering
Papirkromatografi har ikke set meget automatisering gennem årene, men tilgængelige tyndtlagskromatografiinstrumenter har automatiseringsfunktioner, der inkluderer autosampler, konstant volumenprøvedispenser, dokumentation og kamera til opbevaring af billedoptegnelse af separationer
stiv understøttelse
cellulosepapirstøtten i papirkromatografi er fleksibel mens adsorbenten i TLC er belagt på en stiv metal -, glas-eller plastplade. Dette bidrager til reproducerbarhed af pletter og hurtigere udvikling. På grund af understøtningsstivhed er der mindre diffusion, og som følge heraf dannes veldefinerede pletter.
valg af Support
TLC præsenterer et stort udvalg af støtteadsorbentfaser inklusive flydende coatede adsorbenter, som også kan omfatte fluorescensinduktorer. På den anden side er valg af papirer i papirkromatografi meget begrænset.
Udviklingskammerdesign
det er ikke nødvendigt at suspendere pladen som krævet i papirkromatografi fra en stang oven på udviklingskammeret. Den kan simpelthen placeres i en skrå position med bundkanten hvilende på kammerbasen.
prøvevolumen
den anvendte prøvemængde er lille( i mikroliter) og kan reproducerbart påføres ved hjælp af automatiserede prøvedispensere
valg af Sprøjtereagenser
ætsende sprøjtereagenser kan rense filterpapiret og kan endda forringe prøvepladserne. Overtrukne plader, der anvendes i tyndtlagskromatografi, kan i højere grad modstå ætsende sprøjtereagenser
opvarmning
Tyndlagskromatografiplader kan opvarmes, hvis det kræves til pletudvikling. Papirkromatografiark kan ikke modstå opvarmning ud over et punkt.
sammenfattende giver tyndtlagskromatografi flere fordele for separationsvidenskabsmanden kun for en lille ekstra omkostning for de tynde lagbelagte plader.