La cromatografía es una técnica útil para separar, analizar y purificar con precisión una amplia gama de muestras, incluidos alimentos, productos farmacéuticos, pesticidas, muestras de aire y agua y extractos de tejidos.Habrías visto la separación de compuestos de diferentes colores utilizando la sencilla técnica de separación cromatográfica de papel en el laboratorio de tu escuela.
La técnica era fácil de entender y no requería ningún equipo costoso. Le proporcionó una comprensión visual de los conceptos de la ciencia de la separación. En su época universitaria, también se habría encontrado con separaciones de cromatografía de capa delgada de compuestos que incluso después de la separación pueden o no ser identificables por el ojo sin el tratamiento de la placa de separación.
Siga leyendo para obtener más información sobre la cromatografía, las ventajas de la cromatografía, sus tipos y las diferencias entre la cromatografía TLC y la cromatografía en papel.
¿Qué Es La Cromatografía?
Es la técnica de laboratorio para separar diferentes componentes de una mezcla de las fases estacionaria y móvil. En la técnica de cromatografía, diferentes componentes de la mezcla se mueven a través de la fase estacionaria a diferentes velocidades, lo que hace que se separen entre sí y aparezcan en diferentes puntos del adsorbente. La técnica de cromatografía se introdujo por primera vez en el mundo en 1903 por el científico M. S Tswett.
Cromatografía en papel
Es una técnica analítica utilizada para separar partículas en función de su polaridad hacia la fase móvil y la fase estacionaria. La cromatografía de papel es un tipo de método de partición sólido-líquido en el que la fase estacionaria es el papel de filtro de celulosa y la fase móvil es líquida.
Ventajas y desventajas de la cromatografía en papel
La técnica de cromatografía en papel ofrece varias ventajas y desventajas.
Ventajas de la cromatografía de papel
La principal ventaja de la cromatografía de papel es que ofrece operaciones simples, de bajo costo y sin complicaciones. Además, la configuración de la cromatografía en papel ocupa menos espacio y requiere menos cantidad de muestra para el análisis.
Desventajas de la cromatografía en papel
Las sustancias volátiles o complejas no se pueden separar mediante técnicas de cromatografía en papel. El método no es útil para probar un gran número de muestras y los datos no son tan precisos como en el caso de la técnica TLC.
Cromatografía de capa delgada
Es una técnica de cromatografía de adsorción sólido-líquido utilizada para aislar mezclas no volátiles. En el método TLC, la fase estacionaria es la placa de vidrio recubierta con gel de sílice y la fase móvil es el líquido. Las partículas se separan en función de su polaridad hacia la fase móvil y la fase estacionaria.
Ventajas y desventajas de la cromatografía de capa delgada
Si bien la cromatografía de capa delgada ofrece muchas ventajas, también tiene algunas desventajas o limitaciones.
Ventajas de la Cromatografía de capa delgada
Es una técnica altamente sensible que proporciona resultados precisos. El método requiere una cantidad muy pequeña de muestra y solo toma aproximadamente media hora para las separaciones cromatográficas. Además, se puede utilizar una técnica de cromatografía de capa delgada para la detección colorimétrica de separaciones, así como de compuestos que responden a la luz UV.
Desventajas de la cromatografía de capa delgada
A pesar de su conveniencia, la cromatografía de capa delgada no se puede usar para determinar las diferencias entre las formas isoméricas y enantioméricas de un compuesto. Además, el TLC es aplicable solo a compuestos no volátiles, lo que limita su uso.
Cromatografía de capa delgada vs. Cromatografía de papel
Las principales diferencias entre la cromatografía TLC y la cromatografía de papel son:
- El principio detrás de la cromatografía de capa delgada se basa en la adsorción. Por otro lado, el principio de la cromatografía de papel se basa en la partición.
- La cromatografía de capa delgada requiere más tiempo de preparación en comparación con la cromatografía en papel.
- La fase estacionaria de la cromatografía de capa delgada son las placas de vidrio recubiertas con gel de sílice, mientras que la fase estacionaria de la cromatografía de papel es el agua atrapada en el papel de filtro de celulosa.
- En la cromatografía de capa delgada, se pueden usar reactivos corrosivos, pero no en el caso de la cromatografía de papel, ya que los agentes corrosivos pueden destruir el papel.
- Puede ver diferentes puntos bajo la lámpara UV en la cromatografía de capa delgada. Esto es posible porque la mezcla de gel de sílice fluorescente en la placa TLC brilla bajo la luz ultravioleta, haciendo que la mancha oscura sea visible sobre un fondo brillante. Las manchas no se pueden ver utilizando la técnica de cromatografía de papel bajo luz UV.
- La cromatografía de capa delgada requiere más tiempo para la separación de partículas, mientras que la cromatografía de papel requiere menos tiempo.
¿Cuáles son las Ventajas de la Cromatografía de Capa Delgada sobre la Cromatografía de Papel?
La cromatografía de capa delgada ofrece varias ventajas sobre las separaciones cromatográficas de papel. Algunos de los beneficios son:
Ahorro de tiempo
La mayor ventaja que se ofrece al cromatógrafo es el ahorro de tiempo. La cromatografía de papel puede tardar varias horas en desarrollar la placa, mientras que el desarrollo en cromatografía de capa delgada se puede completar en un tiempo mucho más corto (aproximadamente media hora)
Automatización
La cromatografía de papel no ha experimentado mucha automatización a lo largo de los años, pero los instrumentos de cromatografía de capa delgada disponibles tienen capacidades de automatización que incluyen muestreador automático, dispensador de muestras de volumen constante, documentación y cámara para retener el registro pictórico de separaciones
Soporte rígido
El soporte de papel de celulosa en cromatografía de papel es flexible mientras que el adsorbente en TLC está recubierto sobre una placa rígida de metal, vidrio o plástico. Esto contribuye a la reproducibilidad de las manchas y a un desarrollo más rápido. Debido a la rigidez del soporte, hay menos difusión y, como resultado, se forman manchas bien definidas.
Elección de soporte
TLC presenta una amplia selección de fases de adsorbentes de soporte, incluidos adsorbentes recubiertos de líquido que también pueden incluir inductores de fluorescencia. Por otro lado, la elección de papeles en cromatografía de papel es muy limitada.
Diseño de la cámara de desarrollo
No es necesario suspender la placa como se requiere en la cromatografía de papel de una varilla en la parte superior de la cámara de desarrollo. Se puede colocar simplemente en una posición inclinada con su borde inferior apoyado en la base de la cámara.
Volumen de muestra
La cantidad de muestra aplicada es pequeña (en microlitros) y se puede aplicar de forma reproducible con la ayuda de dispensadores de muestras automatizados
Elección de reactivos de pulverización
Los reactivos de pulverización corrosivos pueden carbonizar el papel de filtro e incluso deteriorar las manchas de la muestra. Las placas recubiertas utilizadas en cromatografía de capa delgada pueden soportar reactivos de pulverización corrosivos en mayor medida
Calentamiento
Las placas de cromatografía de capa delgada se pueden calentar si es necesario para el desarrollo de puntos. Las hojas de cromatografía de papel no pueden soportar el calentamiento más allá de un punto.
En resumen, la cromatografía de capa delgada ofrece varias ventajas al científico de separación solo por un pequeño costo adicional de las placas recubiertas de capa delgada.