La chromatographie est une technique utile pour séparer, analyser et purifier avec précision un large éventail d’échantillons, y compris des aliments, des produits pharmaceutiques, des pesticides, des échantillons d’air et d’eau et des extraits de tissus.Vous auriez vu la séparation de différents composés colorés en utilisant la technique de séparation chromatographique sur papier simple dans le laboratoire de votre école.
La technique était simple à comprendre et ne nécessitait aucun équipement coûteux. Il vous a fourni une compréhension visuelle des concepts de la science de la séparation. Au cours de votre période universitaire, vous auriez également rencontré des séparations par chromatographie sur couche mince de composés qui, même après la séparation, peuvent ou non être identifiables à l’œil sans traitement de la plaque de séparation.
Lisez la suite pour en savoir plus sur la chromatographie, les avantages de la chromatographie, ses types et les différences entre la chromatographie sur papier et la chromatographie sur papier.
Qu’Est-Ce Que La Chromatographie?
C’est la technique de laboratoire pour séparer les différents composants d’un mélange des phases stationnaire et mobile. Dans la technique de chromatographie, différents composants du mélange traversent la phase stationnaire à des vitesses différentes qui les font se séparer les uns des autres et apparaissent à différents endroits sur l’adsorbant. La technique de chromatographie a été introduite dans le monde pour la première fois en 1903 par le scientifique M.S Tswett.
Chromatographie sur papier
C’est une technique analytique utilisée pour séparer les particules sur la base de leur polarité vers la phase mobile et la phase stationnaire. La chromatographie sur papier est un type de méthode de séparation solide-liquide dans laquelle la phase stationnaire est le papier filtre en cellulose et la phase mobile est liquide.
Avantages et inconvénients de la chromatographie sur papier
La technique de chromatographie sur papier présente divers avantages et inconvénients.
Avantages de la chromatographie sur papier
Le principal avantage de la chromatographie sur papier est qu’elle offre des opérations simples, peu coûteuses et sans tracas. En outre, la configuration de la chromatographie sur papier occupe moins d’espace et nécessite moins d’échantillon pour l’analyse.
Inconvénients de la chromatographie sur papier
Les substances volatiles ou complexes ne peuvent pas être séparées à l’aide de techniques de chromatographie sur papier. La méthode n’est pas utile pour tester un grand nombre d’échantillons et les données ne sont pas aussi précises que dans le cas de la technique TLC.
Chromatographie sur couche mince
C’est une technique de chromatographie par adsorption solide-liquide utilisée pour isoler des mélanges non volatils. Dans le procédé TLC, la phase stationnaire est la plaque de verre recouverte du gel de silice et la phase mobile est le liquide. Les particules se séparent sur la base de leur polarité vers la phase mobile et la phase stationnaire.
Avantages et inconvénients de la chromatographie en couche mince
Bien que la chromatographie en couche mince offre de nombreux avantages, elle présente également certains inconvénients ou limitations.
Avantages de la chromatographie sur couche mince
C’est une technique très sensible qui fournit des résultats précis. La méthode nécessite une très petite quantité d’échantillon et ne prend qu’environ une demi-heure environ pour les séparations chromatographiques. De plus, une technique de chromatographie en couche mince peut être utilisée pour la détection colorimétrique de séparations ainsi que de composés sensibles à la lumière UV.
Inconvénients de la chromatographie en couche mince
Malgré sa commodité, la chromatographie en couche mince ne peut pas être utilisée pour indiquer les différences entre les formes isomères et énantiomères d’un composé. De plus, la CCM ne s’applique qu’aux composés non volatils, limitant ainsi son utilisation.
Chromatographie sur couche mince par rapport à la chromatographie sur papier
Les principales différences entre la CCM et la chromatographie sur papier sont les suivantes:
- Le principe de la chromatographie sur couche mince est basé sur l’adsorption. D’autre part, le principe de la chromatographie sur papier est basé sur la partition.
- La chromatographie sur couche mince nécessite plus de temps de préparation que la chromatographie sur papier.
- La phase stationnaire de la chromatographie en couche mince est les plaques de verre recouvertes de gel de silice tandis que la phase stationnaire de la chromatographie sur papier est l’eau emprisonnée dans le papier filtre en cellulose.
- En chromatographie sur couche mince, des réactifs corrosifs peuvent être utilisés, mais pas dans le cas de la chromatographie sur papier, car les agents corrosifs peuvent détruire le papier.
- Vous pouvez voir différentes taches sous la lampe UV dans la chromatographie en couche mince. Cela est possible parce que le mélange de gel de silice fluorescent sur la plaque TLC brille sous la lumière ultraviolette, rendant la tache sombre visible sur un fond brillant. Les taches ne sont pas visibles à l’aide de la technique de chromatographie sur papier sous lumière UV.
- La chromatographie sur couche mince nécessite plus de temps pour la séparation des particules alors que la chromatographie sur papier nécessite moins de temps.
Quels sont les Avantages de la Chromatographie sur Couche Mince par rapport à la Chromatographie sur Papier?
La chromatographie sur couche mince offre plusieurs avantages par rapport aux séparations chromatographiques sur papier. Certains des avantages sont:
Gain de temps
Le plus grand avantage offert au chromatographe est le gain de temps. La chromatographie sur papier peut prendre plusieurs heures pour développer la plaque alors que le développement en chromatographie sur couche mince peut être terminé en beaucoup plus peu de temps (environ une demi-heure)
Automatisation
La chromatographie sur papier n’a pas connu beaucoup d’automatisation au fil des ans, mais les instruments de chromatographie sur couche mince disponibles ont des capacités d’automatisation qui incluent un échantillonneur automatique, un distributeur d’échantillons à volume constant, une documentation et une caméra pour conserver les enregistrements picturaux des séparations
Support rigide
Le support papier cellulosique en chromatographie sur papier est flexible tandis que l’adsorbant en CCM est recouvert d’une plaque rigide en métal, en verre ou en plastique. Cela contribue à la reproductibilité des taches et à un développement plus rapide. En raison de la rigidité du support, il y a moins de diffusion et, par conséquent, des taches bien définies se forment.
Choix du support
TLC présente un vaste choix de phases adsorbantes de support, y compris des adsorbants enrobés liquides pouvant également inclure des inducteurs de fluorescence. En revanche, le choix des papiers en chromatographie sur papier est très limité.
Conception de la chambre de développement
Il n’est pas nécessaire de suspendre la plaque comme requis en chromatographie sur papier à une tige située au-dessus de la chambre de développement. Il peut être simplement placé en position oblique avec son bord inférieur reposant sur la base de la chambre.
Volume de l’échantillon
La quantité d’échantillon appliquée est faible (en microlitres) et peut être appliquée de manière reproductible à l’aide de distributeurs d’échantillons automatisés
Choix des réactifs de pulvérisation
Les réactifs de pulvérisation corrosifs peuvent charmer le papier filtre et même détériorer les taches de l’échantillon. Les plaques revêtues utilisées en chromatographie sur couche mince peuvent résister davantage aux réactifs de pulvérisation corrosifs
Chauffage
Les plaques de chromatographie sur couche mince peuvent être chauffées si nécessaire pour le développement de taches. Les feuilles de chromatographie sur papier ne peuvent pas résister au chauffage au-delà d’un point.
En résumé, la chromatographie en couche mince offre plusieurs avantages au spécialiste de la séparation uniquement pour un faible coût supplémentaire des plaques revêtues en couche mince.