La cromatografia è una tecnica utile per separare, analizzare e purificare con precisione una vasta gamma di campioni, inclusi alimenti, prodotti farmaceutici, pesticidi, campioni di aria e acqua ed estratti di tessuti.Avresti visto la separazione di diversi composti colorati usando la semplice tecnica di separazione cromatografica della carta nel tuo laboratorio scolastico.
La tecnica era semplice da capire e non richiedeva attrezzature costose. Ti ha fornito una comprensione visiva dei concetti della scienza della separazione. Nel vostro tempo del college si sarebbe anche incontrato sottile strato cromatografia separazioni di composti che anche dopo la separazione può o non può essere identificabile dall’occhio senza trattamento della piastra di separazione.
Continua a leggere per saperne di più sulla cromatografia, i vantaggi della cromatografia, i suoi tipi e le differenze tra TLC e cromatografia su carta.
Che cos’è la cromatografia?
È la tecnica di laboratorio per separare diversi componenti di una miscela dalle fasi stazionarie e mobili. Nella tecnica di cromatografia, diversi componenti della miscela si muovono attraverso la fase stazionaria a velocità diverse che li fanno separare l’uno dall’altro e appaiono in punti diversi sull’adsorbente. La tecnica della cromatografia fu introdotta per la prima volta nel mondo nel 1903 dallo scienziato M. S Tswett.
Cromatografia su carta
È una tecnica analitica utilizzata per separare le particelle in base alla loro polarità verso la fase mobile e la fase stazionaria. La cromatografia su carta è un tipo di metodo di partizione solido-liquido in cui la fase stazionaria è la carta da filtro in cellulosa e la fase mobile è liquida.
Vantaggi e svantaggi della cromatografia su carta
La tecnica della cromatografia su carta offre vari vantaggi e svantaggi.
Vantaggi della cromatografia su carta
Il vantaggio principale della cromatografia su carta è che offre operazioni semplici, a basso costo e senza problemi. Inoltre, la configurazione della cromatografia su carta occupa meno spazio e richiede meno quantità di campione per l’analisi.
Svantaggi della cromatografia su carta
Le sostanze volatili o complesse non possono essere separate mediante tecniche di cromatografia su carta. Il metodo non è utile per testare un gran numero di campioni e i dati non sono accurati come nel caso della tecnica TLC.
Cromatografia a strato sottile
È una tecnica di cromatografia ad adsorbimento solido-liquido utilizzata per isolare miscele non volatili. Nel metodo TLC, la fase stazionaria è la lastra di vetro rivestita con il gel di silice e la fase mobile è il liquido. Le particelle vengono separate in base alla loro polarità verso la fase mobile e la fase stazionaria.
Vantaggi e svantaggi della cromatografia a strato sottile
Mentre la cromatografia a strato sottile offre molti vantaggi, presenta anche alcuni svantaggi o limitazioni.
Vantaggi della cromatografia a strato sottile
È una tecnica altamente sensibile che fornisce risultati accurati. Il metodo richiede una quantità molto piccola di campione e richiede solo circa mezz’ora o giù di lì per le separazioni cromatografiche. Inoltre, una tecnica di cromatografia a strato sottile può essere utilizzata per il rilevamento colorimetrico di separazioni e composti sensibili alla luce UV.
Svantaggi della cromatografia a strato sottile
Nonostante la sua praticità, la cromatografia a strato sottile non può essere utilizzata per indicare le differenze tra le forme isomeriche ed enantiomeriche di un composto. Inoltre, il TLC è applicabile solo ai composti non volatili, limitando così il suo uso.
Cromatografia su strato sottile rispetto alla cromatografia su carta
Le principali differenze tra TLC e cromatografia su carta sono:
- Il principio alla base della cromatografia a strato sottile si basa sull’adsorbimento. D’altra parte, il principio della cromatografia della carta si basa sulla partizione.
- La cromatografia su strato sottile richiede più tempo di preparazione rispetto alla cromatografia su carta.
- La fase stazionaria della cromatografia su strato sottile è costituita dalle lastre di vetro rivestite con gel di silice mentre la fase stazionaria della cromatografia su carta è costituita dall’acqua intrappolata nella carta da filtro in cellulosa.
- Nella cromatografia a strato sottile, è possibile utilizzare reagenti corrosivi ma non nel caso della cromatografia della carta, poiché gli agenti corrosivi possono distruggere la carta.
- È possibile vedere diversi punti sotto la lampada UV nella cromatografia a strato sottile. Questo è possibile perché la miscela di gel di silice fluorescente sulla piastra TLC si illumina sotto la luce ultravioletta, rendendo la macchia scura visibile su uno sfondo luminoso. Le macchie non possono essere viste usando la tecnica della cromatografia su carta sotto luce UV.
- La cromatografia su strato sottile richiede più tempo per la separazione delle particelle, mentre la cromatografia su carta richiede meno tempo.
Quali sono i vantaggi della cromatografia su strato sottile rispetto alla cromatografia su carta?
La cromatografia a strato sottile offre diversi vantaggi rispetto alle separazioni cromatografiche della carta. Alcuni dei vantaggi sono:
Risparmio di tempo
Il più grande vantaggio offerto al cromatografo è il risparmio di tempo. Carta cromatografia può richiedere diverse ore per sviluppare la piastra mentre lo sviluppo in cromatografia su strato sottile può essere completato in un tempo molto più breve (circa mezz’ora)
Automazione
Carta per cromatografia, non ha visto molto di automazione negli anni, ma la cromatografia su strato sottile strumenti disponibili le funzionalità di automazione sono campionatore, a volume costante campione dispenser, la documentazione e la fotocamera per mantenere pittorica record di separazioni
Supporto Rigido
La carta di cellulosa supporto in carta per cromatografia è flessibile considerando che l’adsorbente in TLC è rivestito su una piastra rigida in metallo, vetro o plastica. Ciò contribuisce alla riproducibilità dei punti e allo sviluppo più rapido. A causa della rigidità del supporto c’è meno diffusione e come risultato si formano punti ben definiti.
Scelta del supporto
TLC presenta una vasta scelta di fasi adsorbenti di supporto tra cui adsorbenti rivestiti con liquido che possono includere anche induttori di fluorescenza. D’altra parte la scelta delle carte nella cromatografia della carta è molto limitata.
Progettazione della camera di sviluppo
Non è necessario sospendere la piastra come richiesto nella cromatografia su carta da un’asta sulla parte superiore della camera di sviluppo. Può essere semplicemente posizionato in posizione inclinata con il bordo inferiore appoggiato sulla base della camera.
Volume del campione
La quantità di campione applicata è piccola( in microlitri) e può essere riprodotta con l’aiuto di distributori automatici di campioni
Scelta dei reagenti spray
I reagenti spray corrosivi possono carbonizzare la carta da filtro e persino deteriorare le macchie del campione. Le piastre rivestite utilizzate nella cromatografia a strato sottile possono resistere in misura maggiore ai reagenti spray corrosivi
Riscaldamento
Le piastre cromatografiche a strato sottile possono essere riscaldate se necessario per lo sviluppo spot. I fogli di cromatografia di carta non possono resistere al riscaldamento oltre un punto.
In sintesi la cromatografia a strato sottile offre diversi vantaggi allo scienziato della separazione solo per un piccolo costo aggiuntivo delle piastre rivestite a strato sottile.