モノクローナル抗体は、当社の施設で多くの異なる細胞株で産生させることができます。 しかし、我々は彼らの堅牢な成長とモノクローナル抗体のFcドメイン上でヒトのようなグリコシル化を実行する能力のためにチャイニーズハムスター卵巣（CHO）
モノクローナル抗体産生のための最適化されたワークフローとタイムラインは、次のように詳述することができます:
- 配列がまだ利用できない場合（可変領域およびリーダー配列については2-3週間）の抗体配列決定; 全長配列の場合は3-4週間）
- 精製タンパク質（質量スペクトルベースの配列）
- ハイブリドーマ細胞株（トランスクリプトミックベースの配列）から)
- 抗体コード遺伝子の適切な発現ベクター、遺伝子合成、クローニングの選択-2–3週間から開始
- トランスフェクション
- 短期プロジェクトまたは中小規模生産（3-4週間から開始）
- 長期プロジェクト、商業および大規模生産（5ヶ月から開始）のための安定した細胞株生成
- 生産のスケールアップおよび浄化（調達期間は量依存しています)
モノクローナル抗体の一過性発現は、ほとんどの用途に十分である。 これらの場合、必要な収率および純度レベルに応じて、トランスフェクション、生産、精製段階（上記のプロセスのステップ4および5）は3〜4週間で始 一過性発現によって産生されるモノクローナル抗体は、予備的特性評価研究、研究プロジェクト、および前臨床試験に使用される。
対照的に、抗体が治療用途に使用される場合、またはin vitro診断および医療機器の構成要素として使用される場合、安定した細胞株が生成されなければ これらのケースでは、トランスフェクション、スクリーニング、およびサブクローニングは5-6ヶ月で開始します。 あらゆる安定した細胞株の生成プロセスの主要な挑戦はmonocloneの選択および安定性の確認の労働集約的な、時間のかかるプロセスから得ます。
詳細には、ベクターのトランスフェクションにより、安定したプール（いくつかのクローンの混合物）が得られ、増幅される。 これらのプールの予備の性格描写は研究者が最も高く、最も一貫した生産の収穫とのそれらを識別することを可能にする。 続いて、非常に生産的なプールはmonocloneの分離のために選ばれます。 Monoclonesは単一細胞から起きる特定の亜集団として定義されます従って、monoclonesは安定して統合されたベクトルおよび同じような生産の収穫と同じ遺伝の背景
単一の細胞を単離することが困難であるため、哺乳類細胞株を扱う場合、”クローン性”を確保することは特に困難な場合があります。 現在、ProteoGenixでのmonoclone単離は、二つの主要な戦略のいずれかを使用して実行することができます:
- 限定希薄方法を使用してMonocloneの選択（4か月で始まる）–この方法はmonocloneの選択へ慣習的なアプローチであり、最低（井戸ごとの理想的には1つの細胞）に各井戸の細胞密度を限るために希薄および拡大の複数の円形を要求する。 他の方法よりも安価であるが、希釈を制限することは、それが非常に労働集約的で時間がかかることがあるという事実を含む重要な欠点を有する。 さらに、希釈によってウェルあたりの細胞数を制限することは、最も豊富なクローンの単離を可能にするだけであり、これは最も生産的なクローンではな
- 検証されたIn-Situ Plate Seeding(VIPS™)法を用いたMonoclone選択(4ヶ月から)–VIPS™法はmonoclone選択の高度なアプローチです。 それは慣習的なアプローチよりより少なく労働集約的である;但し、専門にされた装置の使用を要求する。 VIPS™装置は自動的に96か384の健康なmicroplatesに単一細胞を播くように設計されていた。 伝統的な方法とは対照的に、ほとんどの単一のクローンは、増幅の前に単離され、評価され、研究者が最も豊富なものではないかもしれない最良の候補を選
クローン増幅サイクルの数が少ないことを考えると、VIPS™メソッドは、monocloneスクリーニングと選択に迅速かつより堅牢なアプローチを可能にします。 さらに、5-6ヶ月で始まる安定した細胞株の生成は、数週間で正常に減少させることができる。