RBCの換散の緩衝はいかに働きますか。 -(Nov/04/2010 )

こんにちは。 赤血球溶解緩衝液がどのように機能するかを誰かが教えてくれるかどうか疑問に思っていました。 成分はどのような機能を持っていますか?
私はこのレシピを使用しました:
1l ddh20
8.26g塩化アンモニウム(Nh4Cl)
1g重炭酸カリウム(KHCO3)
0.037g EDTA
pH7.3
噂では、Na+/K+ATPase活性と関係があると
私はこのバッファがどのように機能するかの説明、またはこれに関するlitteratureなどを見つけることができる場所へのヒントを非常に感謝します。
ありがとう!

-CTC-

みんなに来て! 80ビューではなく、単一の返信! 私の質問は不明ですか? それは誰もが知っているか、男を助けるために任意のボディケアをしていないということでしょうか?私はそれについて読むことができる場所のヒントだけでなく、非常に高く評価されるだろう!

-CTC-

もう一つの選択肢は、これらの80の投稿視聴者の多くがあなたのためにこれを調べるのに時間を費やしたことです(私のように、インターネットで1時間………

-リーリー-

金にleelee Nov12 07:43:39 2010言いました:

もう一つの選択肢は、これらの80の投稿視聴者の多くがあなたのためにこれを調べるのに時間を費やしたことです(私のように、インターネットで1時間………

まあそれも可能だと思います。 私は私を助けようとしたあなたのすべての素敵な人々に謝罪し、私はまた、あなたの時間と労力に感謝します!

このような古いスレッドを復活させて申し訳ありませんが、私も答えを知ることに興味がありました。 別のフォーラムでは、誰かが炭酸カリウムの代わりにトリスを使用していますが、それはまだ働いていたので、私はそれがNa+/K+ポンプからどのように
http://www.scienceforums.net/topic/13565-rbc-lysis/

-アーレンハゼ-

親愛なるCTC、
以下の参考文献を参照してください:-
http://ir.library.oregonstate.edu/xmlui/bitstream/handle/1957/13985/Schreck.AnalysisSalmonidLeukocytes.pdf?sequence=3
重要なビットは:-
蒸留水
に置かれた哺乳類の赤血球は、ある臨界点で細胞内部の上昇する
圧力が細胞膜の引張
強さを圧倒し、ヘモグロビンが
(溶血) Delano(1995)は
モデルを開発し、哺乳類
赤血球の浸透圧破裂を引き起こす物理的条件
の重要なセットを予測した。 モデルは、低張性溶液中の赤血球の
運命は、張性、細胞の初期真球度、
水によって占められていない体積の初期画分、および表面積を伸ばすことができる
による最大画分量に
依存することを決定した。
全血のFicoll-Paque単離から赤血球を除去するために、お客様の溶解緩衝液(NH4CL)を使用しています。 我々は好中球、単球、血小板などの後にあるようにRBCのは、不要な汚染物質です。 この溶解緩衝液を使用することにより、これらの細胞は、我々の実験、すなわちNeutraphilsの脱顆粒および走化性を台無しにするような方法で活性化されない。
いことがありますに対する理解に関与する低張性lysisの赤血球の
仕様のダ
おじさん菱

-菱-

こんにちは!

私はこの質問に対する答えを探して最後の数時間を費やし、将来の参考のために投稿すると思っていました。

異なる情報源は異なるものを主張する。 これは基本的に私が見つけたものの組み合わせです。..

純粋な蒸留水に全血を加えると、浸透圧のためにすべての細胞が最終的に破裂します。 だから我々は唯一の赤血球が溶解したいので、手順を変更する必要があります。

Nh4Cl:NH3の浸透がClとOHイオンの間の膜貫通交換を誘導するので、RBCが膨潤する。

KHCO3:RBCの膨潤速度を増加させ、緩衝成分としても機能することができます。

: それはRbc膜を不安定にするMg+2およびCa+2に結合するが、白血球にはそれほど影響しないので、RBCのみを標的とすることができる。 また、最終的にライセートの酸性度と浸透圧を調節し、ヌクレアーゼから(これらの酵素の補因子として機能するイオンに結合することによって)私たちのDNAを保護する塩洗剤でもあります。

-ルナマエ-

主なポイントは、他の細胞のために安全であるが、赤血球の特定の特性、浸透圧ストレスに耐えるために彼らの限られた能力を利用する緩衝液のいず

EDTA添加のためのraesonは、溶解を助けるのではなく、破裂した細胞から放出される分解酵素の阻害でもあり得る。

-Trof-

こんにちは,

の一部が復活す。. この緩衝液による細胞の溶解を止める方法を誰かが知っていますか? 私はPbmcのficoll分離後にRbcを溶解するためにACKバッファを使用します。 問題は、溶解のために5分の時間を超えると、Pbmcも同様に苦しみ、trypan blueを追加し、TC20マシンを介して細胞を数えるために別の部屋に実行する必要があ だから、私はTC20が私の結果を重複させるまでACKバッファがまだ機能している場合、私が得るカウントはどのように代表的なのだろうかと思います。…?

事前にありがとう!

-バッファ77-

あなたの最善の策は、カウントを開始する前にバッファ内のPBMCsを洗うことです:セルをスピンダウンし、ACKバッファを削除し、PBSまたは同様の解決策(例)、その後、カウントのためのアリコートを取ります。

-ボブ1-

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