chromatografia jest użyteczną techniką do precyzyjnego oddzielania, analizy i oczyszczania szerokiej gamy próbek, w tym żywności, farmaceutyków, pestycydów, próbek powietrza i wody oraz ekstraktów tkankowych.W Szkolnym Laboratorium zobaczyłbyś rozdzielanie różnych barwnych związków przy użyciu prostej techniki chromatograficznej separacji papieru.
technika była prosta do zrozumienia i nie wymagała drogiego sprzętu. To dostarczyło wam wizualnego zrozumienia pojęć nauki o separacji. W czasie studiów można również natknąć cienkowarstwowej chromatografii separacji związków, które nawet po separacji może lub nie mogą być rozpoznawalne przez oko bez leczenia płyty separacyjnej.
Czytaj dalej, aby dowiedzieć się więcej o chromatografii, zaletach chromatografii, jej typach i różnicach między chromatografią TLC a chromatografią papierową.
Co To Jest Chromatografia?
jest to technika laboratoryjna służąca do oddzielania różnych składników mieszaniny od fazy stacjonarnej i ruchomej. W technice chromatografii różne składniki mieszaniny poruszają się w fazie stacjonarnej z różnymi prędkościami, co powoduje, że oddzielają się od siebie i pojawiają się w różnych miejscach na adsorbencie. Technika chromatografii została po raz pierwszy wprowadzona na świat w 1903 roku przez naukowca M. S Tswetta.
chromatografia papierowa
jest to technika analityczna stosowana do oddzielania cząstek na podstawie ich polaryzacji w kierunku fazy ruchomej i fazy stacjonarnej. Chromatografia papierowa jest rodzajem metody podziału ciało stałe-ciecz, w której fazą stacjonarną jest papier filtracyjny celulozowy, a fazą ruchomą jest ciecz.
zalety i wady chromatografii papierowej
technika chromatografii papierowej oferuje różne zalety i wady.
zalety chromatografii papierowej
główną zaletą chromatografii papierowej jest to, że oferuje ona proste, tanie i bezproblemowe operacje. Ponadto konfiguracja chromatografii papierowej zajmuje mniej miejsca i wymaga mniejszej ilości próbki do analizy.
wady chromatografii papierowej
substancje lotne lub złożone nie mogą być oddzielone przy użyciu technik chromatografii papierowej. Metoda ta nie jest przydatna do badania dużej liczby próbek, a dane nie są tak dokładne jak w przypadku techniki TLC.
chromatografia cienkowarstwowa
jest to technika chromatografii adsorpcyjnej w stanie stałym i ciekłym stosowana do izolowania mieszanin nielotnych. W metodzie TLC fazą stacjonarną jest płytka szklana pokryta żelem krzemionkowym, a fazą ruchomą jest ciecz. Cząstki zostają rozdzielone na podstawie ich polaryzacji w kierunku fazy ruchomej i fazy stacjonarnej.
zalety i wady chromatografii cienkowarstwowej
chociaż chromatografia cienkowarstwowa oferuje wiele zalet, ma również pewne wady lub ograniczenia.
zalety chromatografii cienkowarstwowej
jest to bardzo wrażliwa technika, która zapewnia dokładne wyniki. Metoda wymaga bardzo małej ilości próbki i zajmuje tylko około pół godziny lub więcej dla separacji chromatograficznych. Dodatkowo, chromatografia cienkowarstwowa może być stosowana do kolorymetrycznego wykrywania separacji, jak również związków reagujących na światło UV.
wady chromatografii cienkowarstwowej
pomimo swojej wygody, chromatografia cienkowarstwowa nie może być używana do odróżnienia izomerycznych i enancjomerycznych form związku. Ponadto TLC ma zastosowanie tylko do związków nielotnych, ograniczając w ten sposób jego stosowanie.
chromatografia cienkowarstwowa a chromatografia papierowa
główne różnice między chromatografią TLC a chromatografią papierową to:
- zasada chromatografii cienkowarstwowej opiera się na adsorpcji. Z drugiej strony zasada chromatografii papierowej opiera się na podziałach.
- chromatografia cienkowarstwowa wymaga więcej czasu przygotowania w porównaniu z chromatografią papierową.
- fazą stacjonarną chromatografii cienkowarstwowej są szklane płytki pokryte żelem krzemionkowym, podczas gdy fazą stacjonarną chromatografii papierowej jest woda uwięziona w celulozowym papierze filtracyjnym.
- w chromatografii cienkowarstwowej można stosować odczynniki korozyjne, ale nie w przypadku chromatografii papierowej, ponieważ czynniki korozyjne mogą zniszczyć papier.
- w chromatografii cienkowarstwowej można zobaczyć różne plamy pod lampą UV. Jest to możliwe, ponieważ fluorescencyjna mieszanina żelu krzemionkowego na płycie TLC świeci w świetle ultrafioletowym, dzięki czemu ciemna plama jest widoczna na świecącym tle. Plamy nie mogą być widoczne przy użyciu techniki chromatografii papierowej w świetle UV.
- chromatografia cienkowarstwowa wymaga więcej czasu na oddzielenie cząstek, podczas gdy chromatografia papierowa wymaga mniej czasu.
jakie są zalety chromatografii cienkowarstwowej w stosunku do chromatografii papierowej?
chromatografia cienkowarstwowa oferuje kilka korzyści w stosunku do separacji chromatograficznych papieru. Niektóre z korzyści to:
oszczędność czasu
największą zaletą oferowaną chromatografowi jest oszczędność czasu. Chromatografia papierowa może potrwać kilka godzin, aby opracować płytkę, podczas gdy rozwój chromatografii cienkowarstwowej można zakończyć w znacznie krótszym czasie (około pół godziny)
Automatyzacja
chromatografia papierowa nie widziała wiele automatyzacji przez lata, ale dostępne instrumenty do chromatografii cienkowarstwowej mają możliwości automatyzacji, które obejmują autosampler, dozownik próbek o stałej objętości, dokumentację i kamerę do przechowywania obrazowego zapisu separacji
sztywne Podparcie
nośnik papieru celulozowego w chromatografii papieru jest elastyczny natomiast adsorbent w TLC jest powlekany na sztywnej metalowej, szklanej lub plastikowej płycie. Przyczynia się to do powtarzalności plam i szybszego rozwoju. Ze względu na sztywność podparcia następuje mniejsza dyfuzja, w wyniku czego powstają dobrze zdefiniowane plamy.
wybór podparcia
TLC oferuje szeroki wybór pomocniczych faz adsorbentów, w tym adsorbentów powlekanych cieczą, które mogą również zawierać induktory fluorescencji. Z drugiej strony wybór papierów w chromatografii papierowej jest bardzo ograniczony.
konstrukcja komory rozwojowej
nie jest konieczne zawieszanie płytki zgodnie z wymaganiami chromatografii papierowej z pręta na górze komory rozwojowej. Można go po prostu umieścić w pozycji skośnej, a jego dolna krawędź opiera się na podstawie komory.
objętość próbki
ilość zastosowanej próbki jest niewielka( w mikrolitrach) i może być powtarzalnie aplikowana za pomocą automatycznych dozowników próbek
wybór odczynników natryskowych
korozyjne odczynniki natryskowe mogą ocierać papier filtracyjny, a nawet pogarszać plamki próbki. Płyty powlekane stosowane w chromatografii cienkowarstwowej mogą w większym stopniu wytrzymać korozyjne odczynniki natryskowe
ogrzewanie
cienkowarstwowe płytki chromatograficzne można ogrzewać, jeśli jest to wymagane do rozwoju punktowego. Arkusze chromatografii papierowej nie wytrzymują ogrzewania poza punktem.
podsumowując, chromatografia cienkowarstwowa oferuje kilka korzyści naukowcom zajmującym się separacją tylko przy niewielkim dodatkowym koszcie cienkowarstwowych płytek powlekanych.